光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
檢測單位：
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
E＝OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
Anthos 酶標儀檢測值計算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測物的透光值為100％。則實際檢測中，檢測物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計算如下：
T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
其中T為透光值， Meas為檢測的二進位數(shù)值， Min為在 0％的情況下檢測的二進位數(shù)值， Max為在100％的情況下檢測的二進位數(shù)值，舉例如下：
MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
Anthos 酶標儀的中心定位
儀器會自動對酶標孔進行中心定位，中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時，儀器其實要進行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
酶標儀的用途和其它提示
用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實驗室，包括臨床實驗室。
質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。
空白校正
有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進行。
檢測結(jié)果的解釋
由于有相當多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不，因此，只有使用同一酶標板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行。
酶標儀的使用注意事項
1、工作環(huán)境
酶標儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DIN VDE 0871條例，儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN 45 635 －19條例：
儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。
為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。
操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15％－85％之間。
操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。
操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。
保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。
2、操作注意事項
酶標儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣，會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應(yīng)注意以下事項：
使用加液器加液，加液頭不能混用。
洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機洗板，避免交叉污染。
嚴格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時間準確。
在測量過程中，請勿碰酶標板，以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。
請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手。
如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害，請嚴格按照試
劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。
如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請進行清洗和消毒。
不要在測量過程中關(guān)閉電源。
對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù)，以達到最佳效果。
使用后蓋好防塵罩。
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